Détection moléculaire du virus de la Dengue par RT-PCR

Détection moléculaire du virus de la dengue par la méthode RT-PCR en temps réel. 

Les échantillons de sérum sont préférables; toutefois, les tests peuvent aussi être réalisés sur des échantillons de plasma ou de liquide céphalo-rachidien (LCR). L’analyse d’autres liquides et tissus corporels pourrait être envisagée; veuillez communiquer avec le laboratoire de diagnostic des zoonoses virales pour vérifier si d’autres échantillons peuvent être utilisés. Le volume minimum est de 600 µl.

Prélever le sang dans des tubes de séparation du sérum – soumettre dans un tube en « O » de 2 ml.

Congeler les échantillons jusqu’à leur envoi pour analyse. Expédier les échantillons congelés sur glace sèche.

L’expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d’information sur la catégorisation des matières à des fins d’expédition, veuillez consulter la partie 2 de l’appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l’IATA sur les produits dangereux.

Infection par le virus de la denguesoupçonnée et antécédents de voyage pertinents. 

Formulaire de demande de tests sérologiques pour certains agents pathogènes viraux transmis par vecteurs et agents zoonotiques, dûment rempli, comprenant le nom, l’adresse et le numéro de téléphone du laboratoire expéditeur, ainsi que le nom et/ou l’identifiant du patient (numéro de référence de l’échantillon), sa date de naissance, le ou les tests demandés, la date de prélèvement de l’échantillon, la date d’apparition des symptômes, le type d’échantillon, ainsi que les antécédents cliniques et les antécédents de voyage du patient.

Il est à noter que le moment du prélèvement de l’échantillon est crucial sur le plan de l’apparition des symptômes pour déterminer les analyses à effectuer et pour l’interprétation des résultats. 

Ce test est considéré comme expérimental, car il n’a pas été validé ou vérifié de manière approfondie

Les tests sont effectués, en totalité ou en partie, au moyen d’une épreuve mise au point en laboratoire qui n’a pas été entièrement validée ni vérifiée, car il n’y a pas de panel bien caractérisé.

Détection du virus de la dengue par RT-PCR en temps réel TaqMan. Quatre épreuves uniplexes distinctes ciblant chacun des quatre sérotypes du virus de la dengue sont réalisées; un résultat est jugé positif si l’une ou l’autre des cibles sont détectées et si la valeur Ct se situe à l’intérieur du seuil préétabli pour une épreuve ou un sérotype précis.

21 jours civils.

1. Johnson, B.W., Russell, B.J. and Lanciotti, R.S. Serotype-specific detection of dengue viruses in a fourplex real-time reverse transcriptase PCR assay. 2005. J. Clin. Micro. 43; 4977-4983.
2. Lanciotti, R.S., Calisher, C.H., Gubler, D.J., Chang, G.J., and Vorndam, V. Rapid detection and typing of dengue viruses from clinical samples by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction. 1992. J. Clin. Micro. 30; 545-551.