Test de sensibilité à la bédaquiline, à la lévofloxacine et à la clofazimine

Sensibilité des isolats de Mycobacterium tuberculosis ou de mycobactéries non tuberculeuses (MNT) à la bédaquiline, à la lévofloxacine et à la clofazimine, réalisée par la méthode de microdilution en bouillon, conformément aux directives du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Veuillez noter que le test de CMI pour la clofazimine chez les espèces de MNT est inclus dans nos panels AST standard.

Culture pure sur milieu solide ou liquide.

·Pour la culture sur milieu solide, colonies isolées sur milieu en plaque.

oLes espèces du complexe Mycobacterium tuberculosis (CMTB) doivent présenter une croissance visible et ne pas dater de plus de 4 semaines.

oLes espèces de mycobactéries à croissance rapide ne doivent pas dater de plus de 10 jours.

oLes espèces de mycobactéries à croissance lente ne doivent pas dater de plus de 4 semaines.

·Pour la culture liquide, un volume minimum de 4 ml de culture en croissance active.

·Si la culture présente une croissance insuffisante, une contamination ou un mélange d'espèces de Mycobacterium, la culture soumise sera rejetée et une nouvelle soumission sera demandée.

S/O

Expédiez toutes les cultures à température ambiante (NE PAS congeler) pour une livraison le lendemain, et avant le mercredi de chaque semaine afin de garantir leur réception avant le vendredi.

L’expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d’information sur la catégorisation des matières à des fins d’expédition, veuillez consulter la partie 2 de l’appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l’IATA sur les produits dangereux.

La tuberculose est une maladie à déclaration obligatoire, et les tests de sensibilité sont obligatoires pour tous les cas au Canada.

Pour les MNT : Les échantillons respiratoires doivent répondre aux recommandations de l'ATS en matière de signification clinique. Pour les échantillons non respiratoires, les lignes directrices du CLSI stipulent que « les tests de sensibilité des MNT ne doivent être envisagés que pour les isolats considérés comme cliniquement significatifs. Les isolats provenant du sang, d'autres liquides organiques stériles ou de tissus sont généralement considérés comme cliniquement significatifs ». Une justification et les antécédents cliniques doivent être fournis avec le formulaire de demande. Les échantillons soumis pour le test de la bédaquiline doivent être cliniquement significatifs et les isolats doivent provenir de patients qui développent une bactériémie pendant un traitement aux macrolides ou de patients qui font une rechute pendant un traitement aux macrolides ou d'autres cas de MNT avec justification clinique. Le test sera effectué lorsque le médecin a l'intention d'utiliser la bédaquiline pour le traitement.

La notification de l’envoi d’échantillons doit être envoyée par courriel ou par télécopie avant l’expédition des isolats. Une demande pour le NRCM et/ou le « Test de sensibilité à la bédaquiline, à la clofazimine et à la lévofloxacine pour les isolats de Mycobacterium tuberculosis »doit être remplie et signée par le superviseur ou la personne désignée du laboratoire provincial ou territorial de soins de santé qui soumet l’échantillon, et doit inclure la source de l’échantillon, le sexe du patient, sa date de naissance, ses antécédents cliniques, l’identifiant du laboratoire qui soumet l’échantillon et les coordonnées de la personne qui le soumet. Veuillez également inclure les caractéristiques de l’isolat : microscopie, pigmentation, caractéristiques de culture, taux de croissance et température de croissance, ainsi que l’identification. Le NRCM fournira les résultats au laboratoire provincial ou territorial qui a soumis la demande, lequel sera ensuite chargé de les transmettre au laboratoire local ou au médecin approprié.

La demande de test doit être accompagnée des résultats des tests de sensibilité de première et/ou deuxième ligne du MTBC ou d'une justification expliquant pourquoi le test est nécessaire. Les cultures seront rejetées si la documentation et la justification appropriées sont incomplètes ou manquantes.

Les tests sont effectués sur des panneaux MTBDST (Thermofisher). Il n’existe actuellement aucune directive du CLSI pour l’interprétation des CMI de la bédaquiline, de la lévofloxacine ou de la clofazimine pour le MTBC ou les MNT. Les valeurs de CMI pour ces antibiotiques sont fournies sans interprétation (1). Le test de sensibilité à la bédaquiline pour les MNT est actuellement en cours de validation par le NRCM; les résultats doivent être considérés comme expérimentaux

Le délai d'exécution est de 45 jours civils à compter de la date de réception de l'échantillon. Ce délai comprend le traitement de l'échantillon et le temps de croissance de la culture.

1.CLSI. Susceptibility Testing of Mycobacteria, Nocardia and Other Aerobic Actinomycetes. 3^rd ed. CLSI standard M24. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2023.

2.Inderlied CB and Pfyffer GE.  (2003)  Susceptibility Test Methods: Mycobacteria, p. 1149 – 77.  In Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, and Yolken RH (ed).  Manual of Clinical Microbiology, 8th ed.  American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3.Sabine Rüsch-Gerdes, Gaby E. Pfyffer, Manuel Casal, Maureen Chadwick, and Salman Siddiqi. 2006. Multicenter Laboratory Validation of the BACTEC MGIT 960 Technique for Testing Susceptibilities of Mycobacterium tuberculosis to Classical Second-Line Drugs and Newer Antimicrobials. J. Clin. Microbiol. 44: 688-692.

4.Gaby E. Pfyffer, Donald A. Bonato, Adeleh Ebrahimzadeh, Wendy Gross, Jacqueline Hotaling, John Kornblum, Adalbert Laszlo, Glenn Roberts, Max Salfinger, Franziska Wittwer, and Salman Siddiqi. 1999. Multicenter Laboratory Validation of Susceptibility Testing of Mycobacterium tuberculosis against Classical Second-Line and Newer Antimicrobial Drugs by Using the Radiometric BACTEC 460 Technique and the Proportion Method with Solid Media. J. Clin. Microbiol. 37: 3179-3186.

5.Annika Krüüner, Malcolm D. Yates, and Francis A. Drobniewski. 2006 Evaluation of MGIT 960-Based Antimicrobial Testing and Determination of Critical Concentrations of First- and Second-Line Antimicrobial Drugs with Drug-Resistant Clinical Strains of Mycobacterium tuberculosis. J. Clin. Microbiol. 44: 811-818.

6.M. K. Sharma, Thibert L., Chedore P., Shandro C., Jamieson F., Tyrrell G., Christianson S., Soualhine H., Wolfe J. (2011).  A Canadian Multicentre Laboratory Study for Standardized Second-line Antimicrobial Susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis.  J. Clin. Microbiol. 49(12): 4112-6.